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非洲猪瘟检测解决方案

非洲猪瘟检测解决方案

一、样品的采集 采样过程中样本不得交叉污染,采样及样品前处理过程中须戴一次性手套。采集发病动物或同群动物的口腔液、全血、血清、病料组织、饺子、(如脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓,样品可研磨充分后离心取上清、也可用拭子充分擦拭脏器表面或蘸取匀浆液)等。采集的样品如不及时使用应在冷藏…

  • 产品概述
  • 产品特点
  • 技术指标
一、样品的采集 采样过程中样本不得交叉污染,采样及样品前处理过程中须戴一次性手套。采集发病动物或同群动物的口腔液、全血、血清、病料组织、饺子、(如脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓,样品可研磨充分后离心取上清、也可用拭子充分擦拭脏器表面或蘸取匀浆液)等。采集的样品如不及时使用应在冷藏(-20°C)和密封状态下运输到相关实验室后,-80℃冷冻保存。 二、样品前处理与核算提取 参照相关标准采集样品,短期保存于-20℃,长期保存请放置于-80℃。       1. 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血 2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温放置 30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或 直接使用水平离心机,3000rpm 离心 5min,吸取上层血清,转移至 1.5mL 灭菌离心管中备用。       2. 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血 2mL,注入含 EDTA2Na(乙二胺四乙酸二钠)或柠檬酸钠抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合 5-10 次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min 后即可分离出血浆,转移至 1.5mL 灭菌离心管中备用。       3. 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入 500 μL PBS 或生理盐水,剧烈振荡 30s,转移至1.5mL 灭菌离心管中备用。       4.病灶组织样品:称取组织约 0.1g 于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加 1mL 生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至 1.5mL 灭菌离心管中备用。       5、饺子:取饺子馅料约 0.1g,于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加 1mL 生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至 1.5mL 灭菌离心管中备用。 动物总 DNA/RNA 提取试剂盒适合于快速从动物组织、血液、分泌物、排泄物等动物样 品中提取高纯度的包含病毒、细菌及寄生虫等生物的总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术, 提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,获得的核酸可直接用于 PCR/RT-PCR、Sorthern 杂交/Northern 杂交、以及 LAMP/RT-LAMP 等系列下游实验。 三、样品检测 本试剂盒适用于动物病料、鼻咽拭子、血液等样品中非洲猪瘟病毒的特异检测,适用于非洲猪瘟病毒(ASFV)的辅助诊断、监测及流行病学调查,检测结果仅供临床参考, 检出限为 10 2 copies/μl。 四、结果判定 4.1 质控标准 4.1.1阴性对照无Ct值并且无扩增曲线。 4.1.2 阳性对照的Ct值应小于等于45,并出现典型的扩增曲线。 4.1.3 如阴性和阳性对照不满足以上条件,此次实验视为无效。 4.2 结果判定 4.2.1 阴性:无Ct值,且无特征性扩增曲线,表明样品为阴性。 4.2.2阳性:Ct值≤60,且出现典型的扩增曲线,表示样品为阳性。 五、检测速度 检测时间总检测耗时45-60分钟。 五、设备和耗材 序号 产 品 名 称 规格 价格(元) 配套 厂家 1 HYG-16YB动物疫病检测套装 16孔套装 65000 含HYG-16YB动物疫病检测仪、恒温金属浴、迷你离心机、可调式涡旋振荡器各1台,移液器3支 上海瑞鑫 2 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法) 48T 3000 A-ASFV-I  22μL× 48 管 B-I  90μL × 1 支 PG-ASFV-I  50μL × 1 支 上海瑞鑫 3 非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测试剂盒(LAMP法) 48T(已包含提取试剂盒) 4200 1.2×LAMP Buffer 625μL 2. 引物液275μL 3. BST酶75μL 4. CMR染料25μL 5. 阳性对照500μL 6. DEPC水1000μL 7. 矿物油1000μL 上海瑞鑫 4 冰箱 保存试剂      
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